Lalanineglycine and Lalanineglutamatetransaminases of Rhizoctonia solani AG 4 النشاط الإنزيمي لـ لألانينجليسين ترانسأمينيز ولألانينجلوتامات ترانسأمينيز في فطرة الرايزوكتونيا سولاني أج 4

Abstract

Cell free extracts of Rhizoctonia solani AG 4 grown on Lalanine as the sole source of nitrogen were found to contain two Lalanine transaminases activities namely Lalanine glycine and Lalanineglutamate transaminase The reversibility of Lalanineglutamate transaminase catalyzed reaction was demonstrated Alternatively the transamination reaction catalyzed by Lalanineglycine transaminase was found to be irreversible The optimum activity of the first enzyme obtained at PH 8 and 40 C while that of the second enzyme obtained at pH 75 and 20 C Km values for all substrate was calculated The activity of second enzyme was stimulated by addition of pyridoxal phosphate whereas hydroxylamine inhibited it The inhibitory effect of hydroxylamine was overcome by pyridoxal phosphate while pyridoxal phosphate did not stimulate the activity of the first enzyme Dialysis for 24 h against 005 M phosphate buffer at PH 8 completely inhibited the activity of the first enzyme while the second enzyme was stable From these result it may be concluded that the two transamination reaction of Lalanine in R solani AG 4 are catalyzed by two different transaminases

أوضحت النتائج التي تم التوصل إليها أن خلاصات خلايا فطرة الرايزوكتونيا سولاني أج 4 حفزت النقل الأميني بين لألانين وكل من الجلايوكسيلات وألفاكيتوجلوتارات لتكوين كل من الجليسين والجلوتامات وبرهنت النتائج أن التفاعل الثاني والمحفز بإنزيم لألانينجلوتامات ترانسأمينيز قابل للإنعكاس أما التفاعل الأول والمحفز بإنزيم لألانينجليسين ترانسأمينيز فيعتبر تفاعلا غير قابل للإنعكاس واتضح أن أعلى نشاط للإنزيم الأول كان عند الرقم الهيدروجيني 57، بينما كان أعلى معدل لنشاط الإنزيم الثاني عند الرقم الهيدروجيني 8 أما فيما يختص بدرجة الحرارة المثلى، برهنت النتائج على أن النشاط الأمثل للإنزيم الأول قد تم الحصول عليه عند درجة حرارة 40 م وكانت الدرجة 20 م هي المثلى بالنسبة للإنزيم الثاني وتم حساب قيمة ثابت ميكالس لكلا الإنزيمين كما أثبتت التجارب أن نشاط أنزيم لألانينجلوتامات ترانسأمينيز يتم تحفيزه بإضافة فوسفات البيرودوكسال، بينما كان للهيدروكسيل أمين تأثير مثبط على هذا النشاط وتم معادلة هذا التأثير المثبط للهيدروكسيل أمين بإضافة فوسفات البيرودوكسال، ويدل هذا على أن الإنزيم يتطلب فوسفات البيرودوكسال كمرافق إنزيمي، ومن ناحية أخرى، أثبتت التجارب أن إضافة فوسفات البيرودوكسال لا تزيد حافزية إنزيم لألانينجليسين ترانسأمينيز وتم دراسة مدى ثبات نشاط كلا الإنزيمين حيث لوحظ أن الفصل الغشائي في المحلول المنظم فوسفات الصوديوم 05 0 مولارعند الرقم الهيدروجيني 8 قد تسبب في فقد الإنزيم الأول لنشاطه كاملا بينما بقي نشاط الإنزيم الثاني ثابتا من خلال النتائج السابقة، يمكن استنتاج أن تفاعلي النقل الأميني لـألانين في فطرة الرايزوكتونيا سولاني أج 4يتم حفزهما بإنزيمي نقل أميني مختلفين