Frequencydomain fluorescence spectroscopy instrumentation and applications
المؤلفون:
Gryczynski Ignacy Lakowiez Joseph R
تاريخ النشر:
1992
الاستشهاد المرجعي :
Frequencydomain fluorescence spectroscopy instrumentation and applications Joseph R Lakowiez and Ignacy GryczynskiThe Arabian journal for science and engineering المجلة العربية للعلوم والهندسة Univeristy of Petroleum and MineralsVol 17 no 2B (April 1992) p p 261286Lakowiez Joseph RGryczynski Ignacy
الملخص:
Timeresolved uorescence measurements are often performed by direct
measurements in the timedomain In this article we describe the alternative
method of frequencydomain uorometry The frequencyresponse of the emission
to intensitymodulated excitation can be used to recover the timedependent
decay Commercial instrumentation now allows measurements to an upper light
modulation frequency limit of 200 MHz This laboratory has developed second and
third generation instruments operating with picosecond laser systems and fast
detectors which allow measurements to 2 GHz and subsequently to 10 GHz The
frequencydomain data from such instrumentation provides excellent resolution of
picosecond decays of intensity and anisotropy Additionally the frequencydomain
method appears to provide remarkable resolution of complex decays which are
often observed for biochemical samples In this article we describe this instrumentation and applications of the frequencydomain method Examples are shown
using probes with ps decay and correlation times the intrinsic uorescence of
proteins and the measurement of diffusion dependent energy transfer We also
describe the use of a pulsed frequencydoubled laser diode as a 413 nm excitation
light source for frequencydomain uorescence measurements يتم عادة تسجيل الفلورة المحللة زمنيا بقياسات مباشرة في المجال الزمني وفي هذه الورقة نصف طريقة بديلة باستخدام فلورة المجال الترددي ؛ حيث يمكن استخدام استجابة تردد الانبعاث للتضمين في شدة التهيج لقياس التضاؤل المعتمد على الزمن يمكن للأجهزة التجارية أن تقيس ذبذبة تضمين للضوء بحد أعلى إلى (200) ميجاهرتز، ولكننا في هذا المختبر طورنا الجيل الثاني والثالث من أجهزة تعمل بأنظمة ليزر البيكوثانية والكاشفات السريعة وبذلك نقيس إلى (2) جيجاهرتز وبالتالي إلى (10) جيجاهرتز إن معلومات المجال الترددي التي يتحصل عليها من هذه الأجهزة تعطي تحليلا ممتازا لتضاؤل الشدة الضوئية في البيكوثانية وفي تباين الخواص وبالإضافة إلى ذلك فإن طريقة المجال الترددي تعطي تحليلا مدهشا للتضاؤل المعقد الذي يلاحظ للمواد البيوكيماوية وفي هذا البحث نصف الجهاز وتطبيقات طريقة المجال الترددي ونعطي أمثلة على استخدام مسابر ذات تضاؤل في البيكوثانية وأوقات الترابط، والفلورة الذاتية للبتروتينات، وقياس نقل الطاقة المعتمد على الانتشار وبالإضافة إلى ذلك نصف استخدام ليزر الدايود النبضية ذات الذبذبة المضاعفة عند طول موجة تهييج (413) نانومتر لقياس فلورة المجال الترددي