Distribution paftern and physical mapping of CCC plasmidmediated multidrugresistance in some Gve bacteria recovered from hospitals and haemodialysis units wastewater at AlMadinah AlMunawarah البلازميدات المسئولة عن مقاومة المضادات الحيوية في البكتيريا سالبة الجرام المعزولة من مياه صرف المستشفيات ووحدات الإستفصاء الدموي المزمن في المدينة المنورة انتشارها وخرائطها

Abstract

أجريت دراسات توصيف بلازميدية على 59 سلالة بكتيريا سالبة صبغة الجرام، مقاومة لتسعة مضادات حيوية حتى تركيز أدنى مثبط أكثر من 100 ميكروجرام مل، معزولة من خمسة مستشفيات وحدتين للإستفصاء الدموي المزمن بالمدينة المنورة، ومنتمية إلى خمس عائلات، وسبع عشرة جنسا، وسبعة وعشرون نوعا، تم إجراء تجارب الكشف عن البلازميدات باستخدام طرق التحضير السريعة المحدودة، وطريقة التحليل القلوية للجدر الخلوية باستخدام المضاد الحيوي المناسب (فانكوميسين بالنسبة للعزلات المنتقاة)، بأحدث أجهزة الرؤية والفحص والتسجيل للجل تم تصوير النتائج ونقلها إلى الكمبيوتر للتحليل وتم قياس هذه البلازميدات بوحدات أزواج القواعد النيتروجينية بالمقابلة امام القياسات الستة لجينوم فيروس لمبدا المهضوم إنزيم 3، ثم استمرت التجربة إلى رسم الخريطة الجينية المبدأية لواحد من أكثر البلازميدات انتشارا في العزلات تحت الدراسة تم رصد سبعة بلازمنيدات مختلفة تواجدت ما بين نوع واحد وثلاثة انواع في السلالة الواحدة، في 40سلالة بكتيرية تنتمي إلى 15 نوعا مختلفا تنتمي إلى سبعة اجناس تم تعريفها في هذه الدراسة ترواحت مقاسات البلازميدات التي تم الكشف عنها وعزلها بين 36844 و 2027 زوجا من القواعد النيتروجينية، وكان مقاس أكثر البلازميدات انتشارا 23130 زوجا من القواعد النيتروجينية (تم رصده في 36 عزلة من مجموع 40 بنسبة انتشار حوالي 90 %) كما انه البلازميد الوحيد الذي تواجد بصفة منفردة في عديد من العزلات مما يسهل دراسات القطع بإنزيمات هضم الحمض النووي د ن ا الداخلية ورسم الخريطة الفيزيائية له استكملت تجارب التحليل الإنزيمي بغرض رسم خريطة مبدأية لهذا البلازميد، باستخدام تسعة من إنزيمات القطع الداخلي Bg1 Sma 1 Sal 1 Sac 1 Pst 1 EcoR 1 Bg1 1 amH 111 and Hind 111 وذلك من مجموع 11 إنزيم، أي بغياب تتابع القطع الذي يتخصص فيه كل من إنزيمي Kpn I and Dpn I

Objective Investigation of the presence and distribution pattern of plasmidlinked antibiotic resistance amongst Gramnegative hacLerial strains recovered froni wastewater of hospitals and haemodialysis units Drawing up a physical map of the most frequently distributed plasmids Methods Representatives Gve bacterial strains; 59 isolates were chosen from a previous study for the same authors as of the most resistant ones (resist more than 3 up to 9 antibiotics to > 1(X) ig ml) Miniprep proLocol and gel electrophoresis technique were adopted for the detection and isolation of ccc plasniid DNA from the differeiitiullyisolated Gve bacteria Restriction analysis using 11 DNA restriction enzymes and “Plasp” computer program against X phage DNA digested with Hind III for physical mapping of the most distributed plasmid Results Resulis revealed the presence of ‘ven different plasmids distributed as 13 different types of plasmids in 68% (4059) of the strains; chosen as representatives of the most resistant ones ( resist more than 3 up to 9 antibiotics to > 1(X) pgmI) The detected plasmid sizes were estimated against HindIlldigested X phage and found ranged from 36844 to 2027 hp Preliminary physical mapping was constructed for the plasmid (23130 hp) that was the most distributed amongst more than k)% of the plasmidhearing strains and was the only found singly Conclusion The isolated characterized and the mapped plasmid (s) suggest the possibility of high rate of both vertical and horizontal distribution of these plasmids amongst the isolated Gy e bacterial Genera and species